在分子生物學和細胞生物學研究中，高效的核酸遞送是基因功能研究、蛋白表達及病毒包裝的關鍵。Polyplus jetprime 轉染試劑（以下簡稱 jetprime）以其z越的轉染效率、極低的細胞毒性和廣泛的適用性，成為科研人員進行瞬轉和穩轉實驗的s選工具。

一、 產品概述與核心優勢

jetprime 是一款專為哺乳動物細胞設計的新一代陽離子聚合物轉染試劑。與傳統的磷酸鈣法和 lipofection 法相比，它具有以下顯著優勢：

1.  高的轉染效率： 在常見的 HEK293、HEK293T、CHO、COS-7 等細胞系中，轉染效率通常可達 90% 以上，非常適合高產量蛋白表達或病毒包裝。

2.  優異的血清兼容性： 支可在含血清培養基中直接進行轉染，無需在轉染前后更換培養基，大大簡化了操作步驟并減少了對細胞的機械損傷。

3.  極低的細胞毒性： jetprime 形成的轉染復合物對細胞膜溫和，即使在難轉染的原代細胞或敏感細胞系中，也能保持高的細胞存活率。

4.  懸浮細胞適配： 不僅適用于貼壁細胞，對懸浮細胞（如 FreeStyle 293-F, CHO-S）也表現出色，是大規模生物生產的理想選擇。

二、 實驗前的準備工作

在開始操作前，請確保以下物品處于最佳狀態：

   細胞狀態： 細胞應處于對數生長期，活率應在 90% 以上。過老或密度過高的細胞會嚴重影響轉染效率。

   DNA 質量： 使用無菌、無內毒素的質粒 DNA。OD260/280 比值建議在 1.8-2.0 之間。

   試劑準備： 將 Polyplus jetprime 轉染試劑 室溫回溫，并溫和渦旋混勻。建議使用不含血清和抗生素的基礎培養基（如 Opti-MEM 或 DMEM）來稀釋 DNA 和試劑。

三、 標準操作步驟（以 6 孔板為例）

以下步驟展示了如何使用 Polyplus jetprime 轉染試劑 進行標準的瞬時轉染：

1.  細胞鋪板：

       在轉染前一天（Day 0），將細胞接種于 6 孔板中。

       接種密度應控制在轉染時匯合度達到 60%-80%（例如 HEK293 細胞通常接種 3-5 × 10^5 cells/well）。

2.  制備轉染復合物：

       稀釋 DNA： 在一個無菌離心管中，加入 100 μL 無血清培養基，然后加入 2 μg 質粒 DNA，輕輕混勻。

       稀釋 jetprime： 在另一個無菌離心管中，加入 100 μL 無血清培養基，然后加入 4 μL Polyplus jetprime 轉染試劑，輕輕混勻。

       混合： 將稀釋好的 jetprime 溶液加入 DNA 溶液中（或反之），立即通過移液器吹打或渦旋震蕩 10 秒鐘，使其充分混合。

       孵育： 將混合液在室溫下靜置孵育 10 分鐘，以形成穩定的 DNA-脂質/聚合物復合物。

3.  加樣：

       孵育結束后，將 200 μL 復合液逐滴加入含有細胞和完q培養基（含血清）的 6 孔板中。

       輕輕搖動培養皿，使復合物均勻分布。

4.  培養與檢測：

       將細胞放回 37°C、5% CO2 培養箱中繼續培養。

       通常在轉染后 24-48 小時即可檢測基因表達情況或收集上清液。

 四、 關鍵參數優化建議

為了獲得最佳實驗結果，針對不同細胞類型可能需要對 Polyplus jetprime 轉染試劑 的用量進行微調：

   DNA 與試劑比例： 推薦的起始比例是 1 μg DNA : 2 μL jetprime。如果發現細胞毒性較大，可適當減少試劑用量（如 1:1.5）；如果轉染效率偏低，可適當增加試劑用量（如 1:3）。

   DNA 用量： 對于 6 孔板，通常每孔 DNA 用量為 1-2 μg。增加 DNA 量并不總是線性增加表達量，過量反而可能導致毒性。

   抗生素使用： 轉染過程中及轉染后 24 小時內，建議避免使用抗生素（如青霉素-鏈霉素），因為轉染會導致細胞膜通透性暫時增加，抗生素可能引起細胞死亡。

 五、 常見問題解答

   Q: 轉染后細胞大量死亡，為什么？

       A: 可能是 Polyplus jetprime 轉染試劑 用量過多，或者細胞鋪板密度過低。請嘗試降低試劑用量或增加細胞接種密度。

   Q: 蛋白表達量很低？

       A: 檢查質粒質量，確認啟動子是否適合該細胞系。可以嘗試延長復合物孵育時間至 15-20 分鐘，或者增加 DNA 用量。

   Q: 是否適用于無血清培養基？

       A: 是的，jetprime 完q適用于無血清培養基和化學成分限定培養基，這在生物制藥上游工藝中尤為重要。

 六、 總結

Polyplus jetprime 轉染試劑 憑借其“高效、低毒、簡便”的特點，極大地優化了核酸轉染實驗流程。無論是小規模的實驗室研究還是大規模的蛋白生產，遵循本文所述的說明書操作指南并進行適當優化，都能助您獲得穩定可靠的實驗數據。

供應商信息：

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